Adenovirus hröð próf-nefseyting

Fyrirhuguð notkun:

SARS-CoV-2 kjarnsýruprófunarsett er notað fyrir eigindlega greiningu á kjarnsýru af COVID-19 í nefkoksþurrku, munnkoksþurrku og hráka. Prófunarniðurstöðurnar gefa sameindagreiningargrundvöll fyrir sýkingu eða grunaða sjúklinga og ætti ekki að nota sem eina viðmiðun fyrir klíníska greiningu.

Efni:

Prófunaraðferð:

A. Sýnaundirbúningur

Útdregið RNA er upphafsefnið fyrir SARS-CoV-2 kjarnsýruprófunarsettið.

Mikilvægt: Hverja kjarnsýruútdráttaraðferð verður að fara fram samtímis með einni jákvæðri samanburði (40 μL, þynnt með dauðhreinsuðum saltlausnum/PBS í æskilegt rúmmál) og einni neikvæðri samanburði (40 μL, þynnt með dauðhreinsuðum saltvatnslausnum/PBS í æskilegt magn).

Mælt er með því að nota eftirfarandi kjarnsýruútdráttarsett til sölu: PureLinkTM Veiru RNA/DNA Mini Kit (Invitrogen); Veiru RNA Mini Kit (QIAGEN); TIANamp Hi-DNA/RNA Kit (TIANGEN);

B. Uppsetning hvarfblöndunar

1. Öll hvarfefni og sýni ætti að þíða alveg, blanda alveg saman og skila stuttlega í skilvindu við stofuhita (á bilinu 18 til 25 gráður) fyrir notkun.

2. Tilbúið tilskilið rúmmál af hvarfblöndunni í viðeigandi stærð pólýprópýlen örskilvindurörs.

3. Pípettaðu 25 µL af hvarfblöndunni í hvern nauðsynlegan brunn á viðeigandi ljósfræðilegri 96-brunns hvarfplötu eða viðeigandi sjónhvarfsrör.

C. Viðbót á sniðmáti

1. Bætið við 5 μL af útdregnu RNA úr sýnum/Jákvæðri stjórn/Neikvæð stjórn. Heildarrúmmálið er 30 μL.

2. Blandið sýnunum og eftirlitsstofnunum vandlega saman við hvarfblönduna með því að pípa upp og niður/Vortex.

3. Lokaðu 96-brunnhvarfplötunni með viðeigandi lokum eða ljóslímfilmu og hvarfrörunum með viðeigandi lokum.

4. Settu 96-brunn hvarfplötuna í skilvindu með örtítraplötusnúningu í 30 sekúndur við um það bil 2500 snúninga á mínútu.

D. Forritun á rauntíma PCR tækinu

Fyrir grunnupplýsingar varðandi uppsetningu og forritun mismunandi rauntíma PCR tækja, vinsamlegast skoðaðu notendahandbók viðkomandi tækis. Greiningin hefur verið fínstillt fyrir ABI7500 rauntíma PCR kerfið. PCR keyrslan er framkvæmd við hjólreiðaskilyrði eins og lýst er í töflunni hér að neðan.

Skilgreindu flúrljómunarskynjara

*Vinsamlegast stilltu flúrljómun innri tilvísun tækisins á "None", til dæmis: Fyrir ABI röð hljóðfæri skaltu stilla "Passive Reference" á "None".

E. Gagnagreining

Vinsamlegast stilltu greiningarfæribreytur og greindu gögnin í samræmi við notkunarleiðbeiningar viðkomandi tækja.

Tökum ABI 7500 sem dæmi:

Grunnlínan ætti að vera stillt á svið sem útilokar bakgrunnsflúrljómun sem fannst í fyrstu lotum mögnunar, en sem skarast ekki svæðið þar sem mögnunarmerki rísa upp fyrir bakgrunn (upphafsgildi:3~10; Lokagildi: {{2} }). Cycle Threshold (Ct) ætti að vera í grunni veldisfasa. Smelltu á "Aalysis" til að fá greiningarniðurstöðuna sjálfkrafa og lestu greiningarniðurstöðuna í "Report" glugganum.

maq per Qat: adenovirus hröð próf - nef seyti, Kína, birgja, framleiðendur, verksmiðju, magn